中华人民共和国国家标准
大米中杀虫环残留量测定方法
Method
for determination of evisect
(thiocyclam)
residues in rice
GB/T 14929.7－94
1 主题内容与适用范围
本标准规定了用气相色谱法测定大米中杀虫环的含量。
本标准适用于大米中杀虫环的残留量测定。
本方法最低检出限为4.7×10-9g。
2 原理
大米样品在酸性条件下，杀虫环经甲醇提取后，通过液－液分配纯化后再转溶至甲醇中，用备用电子捕获检测器的气相色谱仪测定，与标准比较定量。
3 试剂
所用试剂为分析纯试剂。
3.1
盐酸；5mol/L。
3.2
无水硫酸钠：用前于105℃烘2h，备用。
3.3
助滤剂：celite 545。
3.4
甲醇：在本色谱条件下应无杂质峰，否则应重蒸馏至合格。
3.5
二氯甲烷：取一定量的二氯甲烷，用其体积一半的水振摇洗涤5或6次（最后一次必须待分层清楚后，放出二氯甲烷层，应避免将水带入，以免加浓酸时爆沸产生危险！），再用其5%体积的浓硫酸振摇洗涤，直至硫酸不变色。然后用5%氢氧化钠溶液洗涤于中性，蒸馏水洗2或3次，再经无水硫酸钠脱水干燥，通过全玻璃装置重蒸馏，取其39～41℃馏分，经检验不含杂质峰。
3.6
1%草酸－甲醇溶液
3.7
固定相：5%OV－225Chromosorb W(AW-DMCS)。
3.8
杀虫环标准溶液：用甲醇将杀虫环标准品配制成2.0μg/mL的工作液。
4 仪器
4.1
气相色谱仪（具备63Ni）放射源的电子捕获检测器）。
4.2
稻谷出糙机。
4.3
小型电动粉碎机。
4.4
旋转式蒸发浓缩器。
4.5
往复式电动振荡器。
4.6
60mL分液漏斗若干。
5 分析步骤
5.1
提取：将大米粉碎40 目过筛，称取40g，放入250mL具塞三角烧瓶中，加甲醇100mL和5mol/L盐酸1.0mL，于振荡器上激烈振荡1h后，通过盛有少量celite545的滤纸过滤。收集50mL滤液转入250mL圆底烧瓶中，用旋转蒸发器于50℃水浴中浓缩至2～3mL左右。
5.2
纯化：将残留液转至60mL分液漏斗中，分别用蒸馏水和二氯甲烷20mL分两次洗涤烧瓶，每次洗液合并到分液漏斗中，然后用pH试纸检查水层pH值应为1左右。
振荡分液漏斗30s静置分层后，弃去下部二氯甲烷层，再用20mL二氯甲烷振摇洗涤3～4次，弃去二氯甲烷层。向分液漏斗中慢慢加入少量粉末碳酸氢钠至pH7～8。用30mL二氯甲烷轻轻振摇提取水层共3次，每次将二氯甲烷提取液通过盛有无水硫酸钠的漏斗滤入250mL圆底烧瓶中，加0.2mL
1%草酸－甲醇溶液和5mL甲醇，用旋转蒸发器于30℃水浴中浓缩至1.0mL左右，残留液转入具塞刻度试管中，视含量高低用甲醇定容至5～10mL。取1.0μL进入色谱仪，外标法定量。
5.3
气相色谱条件
5.3.1
色谱柱：Ф2mm×2m玻璃柱
填装涂有5%OV－225Chromosorb
W(AW – DMCS)的固定相。
5.3.2
温度
柱温：180℃；
汽化室温：200℃；
检测室温：240℃。
5.3.3
气体速度：载气（氮气）流速30mL/min。
5.3.4
其他条件
仪器灵敏度：10；
衰减：16；
纸速：0.4cm/min；
氮气：高纯氮。
5.4
测定
按上述色谱条件调试仪器，待稳定后用微量注射器注入样品或标准液，以保留时间为定性指标。
将杀虫环的标准液用甲醇稀释成0.4、0.8、1.2、1.6、2.0μg/mL的系列工作液，分别注入色谱仪1.0μL，测量峰高。以杀虫环量为横坐标，峰高为纵坐标绘制工作曲线，根据样品的峰高定量。
6 计算
式中：Ｘ――样品中杀虫环含量，mg/kg；
Ｂ――测得样品的峰高值，查标准曲线后得到的杀虫环量，mg；
Ｖ――定容体积，mL；
Ａ――进样量，μL；
m――样品质量，g；
2――测定值相当于样品量一半，计算全量应乘以2。
7 精密度和灵敏度
7.1
精密度
大米样品添加回收实验结果的变异系数小于10%。
7.2
灵敏度：0.001mg/kg。
8 其他
大米中杀虫环及标准品杀虫环色谱图如下：
a. 标准品色谱图
b. 样品色谱图
(Ⅰ)－沙蚕毒；(Ⅱ)－易卫杀
(Ⅰ)－沙蚕毒；(Ⅱ)－易卫杀
附加说明：
本标准由卫生部卫生监督司提出。
本标准由浙江省医学科学院负责起草。
本标准主要起草人蒋世熙、夏虹。
本标准由卫生部委托归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。
